zeta life轉(zhuǎn)染原代大鼠肝細(xì)胞（IF6.684）文章分享

一、原代肝細(xì)胞轉(zhuǎn)染siRNA簡述
小干擾RNA轉(zhuǎn)染，將原代肝細(xì)胞接種到6孔板或96孔板的含10% FBS Eagle培養(yǎng)基中,培養(yǎng)二十四幾小時后，用100 nM的CHOP siRNA 或100 nM 陰性對照 siRNA (siNC) 使用美國Zeta Life公司Advanced DNA RNA轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染原代肝細(xì)胞（貨號：AD600050，Zeta life，United

States）。 以下CHOP siRNA序列用于轉(zhuǎn)5'-CAGUAUCUUGAGUCUAAUATT-3'和 5'-UAUUAGACUCAAGAUACUGTT-3' , 轉(zhuǎn)染 24 h 后，將肝細(xì)胞放置于300 μM MCT 36 h，然后對細(xì)胞活力、Annexin-V/PI 染色或蛋白質(zhì)印跡測定。
培養(yǎng)條件：選擇美國Zeta Life公司胎牛血清（＃z7181FBS-500）對原代肝細(xì)胞培養(yǎng)，并完成后期培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)。

二、Small Interfering RNA Transfection 原文分享

Hepatocytes were seeded into 6-well plates or 96-well plates in Dulbecco’s Modifified Eagle Medium with 10% FBS. Twenty-four hours later, they were transfected with 100 nM of CHOP siRNA or 100 nM of negative control siRNA (siNC) using Advanced Transfection Reagent (Catalog No.: AD600050, Zeta life, United States) according to the manufacture’s protocol. The followingCHOP siRNA sequences were used for transfection: 5′-CAG

UAUCUUGAGUCUAAUATT-3′ (sense) and 5′-UAUUAG ACUCAAGAUACUGTT-3′ (antisense)  After 24 h transfection, hepatocytes were exposed to 300 μM of MCT for another 36 h, followed by the cell viability assay, Annexin-V/PI staining, or western blotting

三、美國Zeta Life 公司與美國加利福尼亞大學(xué)舊金山校區(qū)聯(lián)合開發(fā)用于哺乳動物細(xì)胞、活體動物轉(zhuǎn)染的 Advanced DNA RNA 第三代多肽小分子轉(zhuǎn)染試劑，此技術(shù)成為新的蛋白功能、免疫細(xì)胞及干細(xì)胞治療、研發(fā)及生產(chǎn)的主要關(guān)鍵技術(shù)之一。

四、文獻(xiàn)中所用轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱：Advanced DNA RNA 轉(zhuǎn)染試劑

貨號：AD600025、AD600050、AD600075、AD600150

規(guī)格：0.25ML、0.5ML、0.75ML、1.5ML

安培生物科技有限公司是美國 Zeta Life 公司的中國代理商。Advanced DNA RNA轉(zhuǎn)染試劑，均經(jīng)過反復(fù)充分驗(yàn)證，轉(zhuǎn)染效果好且重復(fù)性佳，提供完整售后服務(wù)和技術(shù)支持。

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安培生物堅(jiān)持為生命科學(xué)研究、活體動物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域客戶，提供*細(xì)胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑；inviCELL™Platelet lysate無動物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn)，包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等，為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無血清細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù)；提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細(xì)胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品；提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對細(xì)胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)，努力發(fā)展為基因治療、細(xì)胞治療的生物科技企業(yè)。